層流手術室在維護的時候我們做得重點工作是三個方面，這幾個方面做好了，我們就能夠放心地使用手術室，如果做不好，就存在一定的風險，對患者會造成一些嚴重的影響，所以我們必須要了解。
1、有人維護，定期監測（Food Monitor)
層流手術室整個空調系統應有人負責，定期巡查、維修、維護，對過濾網(Filter mesh)及時清洗。潔凈手術室層流系統是創造潔凈手術室的一種設備，無論它多么先進，但亦非"萬能"；因層流系統并無消毒滅菌之功效，層流手術室其"無菌"環境主要是通過空氣的"過濾"、"層流"以及室內維持"正壓"狀態來維持的。每個月對手術室空氣、手術室人員的手及手術室無菌(意思:沒有活菌)（fungus)物品表面采樣進行特殊結構:莢膜、鞭毛、菌（fungus)毛培養，巡查凈化效果，發現不合格及時找出原因，并采取有效措施（指針對問題的解決辦法)。
2、回風口及地面的清潔維護
每日早晨用濕布抹擦所有物體表面及回風口，每周徹底（thorough)清洗回風口、天花板的回風紗窗。凈化手術室各手術室空氣凈化系統在手術室墻面四角、凈化機組、天花板、走廊、新風機、排風機都設有不同級別的過濾器，并對其進行定期清潔、維修和更換，嚴格保證室內空氣的無菌。地面每日用專用的清潔劑拖擦，再用清水拖凈，如有血跡及其它污染物污染時，應及時用消毒劑擦洗。搬運重物時應在地面上墊其它物品，以免在地面上劃痕。
3、電動門的維護
層流手術室的電動門開關方式包括電動、感應、手動三種。層流手術室不同級別的層流系統，其控制空間環境中的空氣置換率也不同，潔凈度級別越高，置換率越快，反之亦然。層流手術室墻壁應用具有抑菌作用的特殊涂料粉刷，光線明亮，色彩柔和且不須用水清潔沖洗。電動開關只需用手或肘部輕輕按壓即可，切忌重壓或長時間按壓。使用感應時只需膝部或腳接近感應窗口，門便自動開啟。如果出現故障時需關閉電源，利用手動，切忌強行拖拉。工作人員合理安排工作程序(procedure)，避免增加不必要的開門次數。