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巴中PCR基因擴增實驗室設計

網站編輯 2022-03-15 01:17:03 閱讀

PCR基因擴增實驗室設計PCR基因擴增實驗室設計

針對于PCR基因擴增實驗室,本文主要從PCR基因擴增實驗室名詞解釋,PCR基因擴增實驗室必須擁有的條件和PCR基因擴增實驗室建立辦法流程幾大方面概要說明,具體更多相關技術知識務必關注我們的網站或者直接聯系我們。

PCR基因擴增實驗室名詞解釋:PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術,用于放大特定的DNA片段,可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統,能迅速掌握患者體內的病毒含量,其精確度高達納米級別,精確檢測乙肝病毒在患者體內存在的數量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據。

基因擴增實驗又稱PCR實驗,其特點是能將微量的DNA大幅增加,PCR是分子生物學研究和實驗的常規方法,廣泛應用于生物學各個領域,例如:艾滋病檢測、乙型肝炎、禽疫病、癌基因的檢測和診斷,DNA指紋、個體識別、親子鑒定及法醫物證,動、植物檢疫,動物及其衍生產品檢測,動物飼料、化妝品、食品衛生檢測,轉基因作物與轉基因微生物檢測等。

一、PCR基因擴增實驗室必須擁有的條件:
1、必須在無菌無塵環境下進行操作;
2、檢測人員必須通過國家臨檢中心業務培訓并取得合格證書;
3、必須通過國家臨床檢驗中心的驗收和認證;
4、檢測設備必須符合標準PCR熒光實驗室設置要求;
5、必須擁有標準的的PCR熒光實驗室;

二、PCR基因擴增實驗室建立辦法流程:
1、建立樣品準備區;
2、樣品準備和RNA-PCR RNA-PCR的額外步驟需要額外的樣品操作,這樣增加了樣品之間污染的機會。為了避免這一問題,反轉錄一步可以在樣品準備區進行。在RNA-PCR中應用UNG以防止污染的方法也有報道;
3、建立前PCR區;
4、PCR實驗室試劑的操作;
5、在前PCR區建立PCR混合物;
6、控制污染的方法;
7、后PCR區PCR完成以后,需要分析樣品并解釋數據,應該留出一個專門用于反應后處理樣品的地方;

PCR實驗室布局
PCR實驗室原則上為試劑準備區、樣品制備區、擴增區和擴增產物分析區四個單獨的工作區域并設有專用走廊,各工作區域應設緩沖間,工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區應是分隔獨立的,各工作區有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區,擴增前區與擴增后區應嚴格分開。實驗材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴增前區流向擴增后區,即從試劑準備區→樣品制備區→擴增區→擴增產物分析區,不得逆向流動。實驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區,不得逆向流動。各工作區頂部應安裝紫外燈,紫外燈的波長為254nm,每20㎡一支40W的紫外燈。

驗室各區功能及主要設備
1、試劑準備區:主要進行試劑的制備、分裝和主反應混合液的制備。試劑和用于樣品制作的材料應直接運送至該區,不得經過其它區域。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的試劑。本區主要設備有天平、冰箱、離心機、加樣器、振蕩器等。
對于氣流壓力的控制,本區并沒有嚴格的要求。
2、樣品制備區:主要進行樣品的保存、核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。本區主要設備有冰箱、生物安全柜、離心機、加樣器、振蕩器、恒溫水浴等。
本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為正壓,以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。
3、擴增區:主要進行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑準備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。本區主要設備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。
本區的壓力梯度要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免氣溶膠從本區漏出。
4、擴增產物分析區:擴增產物的測定。本區主要設備有酶標儀、洗板機、加樣器和水浴箱等。
本區的壓力梯度的要求為:相對于鄰近區域為負壓,以避免擴增產物從本區擴散至其它區域。

PCR實驗室通風系統及壓力控制
各區域之間應具備單向的實驗工藝流、物流、人流與氣流,形成單向流程的保護屏障,避免實驗之間的相互干擾,防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。

PCR實驗室裝飾
實驗室圍護結構應牢固、氣密性好;所有陰陽角宜采用圓弧過渡;墻體內壁光潔、不積塵、耐腐蝕、易清洗消毒;地面使用PVC卷材或環氧樹脂自流坪,材料應滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐腐蝕的要求。五、PCR實驗室注意事項
1、幾個區域的大小設置情況,試劑準備區、擴增區、擴增產物分析區,空間可以相對小一些,樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱,空間應大一些。
2、試劑準備區、樣品制備區設緊急洗眼器,以保證操作人員的安全。
3、PCR實驗室沒有嚴格的凈化要求,可以根據用戶的使用情況和資金的投入選擇。

總之PCR基因擴增實驗室,從實驗室設計實驗室規劃實驗室建設都是技術含量比較高的系統工程,需要專業公司團隊開展,否則無法達到理想效果,我們科瓦特在PCR基因擴增實驗室有著豐富的實踐經驗,如有需要做PCR基因擴增實驗室報價的,急切想知道自己企業需要做的PCR基因擴增實驗室價格,甚至需要免費PCR基因擴增實驗室設計的都可以直接聯系我們!

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